超級(jí)核酸酶(BenzoNuclease)
Cat.No. :RBN001
儲(chǔ)存溫度: -20℃
來(lái)源 : 重組核酸酶,基因工程生產(chǎn),大腸桿菌表達(dá)。
一. 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
BenzoNuclease 是一種來(lái)自于粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens),經(jīng)基因工程改造的核酸內(nèi)切酶。BenzoNuclease可降解雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀的DNA和RNA,完全將核酸降解成3~5個(gè)堿基長(zhǎng)度的5'-單磷酸寡核苷酸。因其能高效降解任何形式的 DNA 和 RNA,又被稱為“超級(jí)核酸酶”。
無(wú)論在實(shí)驗(yàn)室研究還是在工業(yè)級(jí)生產(chǎn)的過(guò)程中,BenzoNuclease是去除生物制品中所有形式DNA和RNA的一種有效工具酶。通過(guò)高效的核酸去除,可顯著提升后續(xù)實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)的效果及產(chǎn)量,性能優(yōu)于其他核酸去除方法。
二. 產(chǎn)品特性
項(xiàng)目 | 標(biāo)準(zhǔn) | 方法 |
外觀 | 無(wú)色通明溶液 | 目測(cè)檢測(cè) |
活性 | ≥250KU/ml | 降解鮭魚(yú)精子NDA法 |
純度 | ≥98% | SDS-page電泳檢測(cè) |
細(xì)菌內(nèi)毒素 | ≤0.25EU/KU | 藥典檢測(cè)方法 |
宿主DNA | ≤100pg/mg | 熒光PCR方法 |
宿主殘余蛋白(HCP) | ≤50ppm | 藥典檢測(cè)方法 |
無(wú)菌 | 符合規(guī)定 | 藥典檢測(cè)方法 |
分子量 | ~28KD | SDS-page電泳檢測(cè) |
活性定義:
在37℃,pH 8.0反應(yīng)條件下,2.625 mL反應(yīng)體系中,在30 min內(nèi)使△A260吸收值變化1.0(相當(dāng)于完全消化37 μg鮭魚(yú)精DNA成為寡核苷酸)所用的酶量定義為一個(gè)活性單位(U)。
三. 使用方法
1.細(xì)胞處理:a.貼壁細(xì)胞去除培養(yǎng)基,用 PBS 洗后,1mLRIPA 裂解液(或其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞裂解液)加1-2uL(0.1-1μl)核酸酶,室溫或冰上孵育 5-30min,收集裂解液,離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。b.懸浮細(xì)胞離心收集后,在離心管中加 1mLRIPA 裂解液(或其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞裂解液)加1-2uL(0.1-1μl )核酸酶,室溫或冰上孵育 5-30min,收集裂解液,離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。
2.組織樣品:將 30-100mg 動(dòng)物或者植物組織研磨充分后,加入 100-200uL 裂解液,同時(shí)加入 0.5-1uL 核酸酶,室溫或冰上孵育 5-30min,收集裂解液,離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。
3.大腸桿菌或者其他細(xì)菌:細(xì)菌離心收集后,用裂解液裂解或者研磨破碎后,每 1mL 加 0.5-1uL 核酸酶,室溫孵育 5-30min,收集裂解液,離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。
注:若溶液為高鹽溶液,偏酸性或偏堿性,含有較高濃度的去垢劑、變性劑,應(yīng)適當(dāng)增加酶量或者孵育時(shí)
間。
反應(yīng)條件 | 最佳 | 有效 |
Mg+ | 1-2Mm | 1-10mM |
PH | 8.0-9.2 | 6.0-10.0 |
溫度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100mM | 大于100mM |
BME | 0-100mM | 大于100 mM |
鈉離子、鉀離子等 | 0-20mM | 0-150 mM |
PO43- | 0-10mM | 0-100mM |
最佳條件為酶活保留90%以上的反應(yīng)條件;有效條件為酶活保留15%以上的反應(yīng)條件。
四. 儲(chǔ)存和運(yùn)輸穩(wěn)定性
儲(chǔ)存穩(wěn)定性:-20℃或以下保存,二年有效。
運(yùn)輸穩(wěn)定性:冷藏運(yùn)輸,活性穩(wěn)定。
注意:本產(chǎn)品不建議-70oC 保存,凍融可能會(huì)降低本產(chǎn)品的酶活性。
五. 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
無(wú)動(dòng)物源性:重組生產(chǎn),無(wú)外源性的病毒污染,生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料。
質(zhì)量穩(wěn)定:批量生產(chǎn),可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn);產(chǎn)品批次間無(wú)差異,質(zhì)量穩(wěn)定。
純度高:比活高;宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
符合法規(guī)要求:生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求,生產(chǎn)過(guò)程完全遵循NSF ISO 9001:2015質(zhì)量體系并符合GMP指導(dǎo)原則。
質(zhì)量文件完整:按客戶需求,可提供相關(guān)法規(guī)支持文件。
六. 相關(guān)產(chǎn)品
重組sumo酶;
重組TEV酶;
重組腸激酶。
僅供科研生產(chǎn)使用,不能用于人體。