重組SUMO酶
Cat.No. ：RSP001
儲(chǔ)存溫度： -20℃
來源 ： 重組SUMO酶，基因工程生產(chǎn)，大腸桿菌表達(dá)。
1. 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
SUMO蛋白酶識(shí)別完整的含有100個(gè)氨基酸的SUMO（Small Ubiquitin-like Modifier）標(biāo)簽蛋白，并能高效地把SUMO從融合蛋白上切割下來。與EK和TEV等蛋白酶的識(shí)別位點(diǎn)相比，由于其識(shí)別序列長(zhǎng)，所以SUMO蛋白酶酶切反應(yīng)有很高的特異性，且在較寬范圍的反應(yīng)環(huán)境體系中保持較高的活力，例如溫度（4-30℃）、pH（5.5-9.5）等。SUMO蛋白酶還具有多聚His標(biāo)簽，便于使用親和層析的方法，去除SUMO蛋白酶，純化目的蛋白。
2. 產(chǎn)品特性
中文別名（Chinese synonym） | SUMO蛋白酶 |
英文別名（English synonym） | SUMO Protease |
來源（Source） | 大腸桿菌表達(dá) |
標(biāo)簽（label） | 多聚His標(biāo)簽 |
純度（Purity） | 經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析，純度> 90% |
分子量（Molecular weight） | 26.55 kDa |
緩沖液組分（Buffer） | 500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT |
活力單位：30℃，SUMO Protease 1小時(shí)酶切2ug含有酶切位點(diǎn)的融合蛋白，酶切效率達(dá)85%以上所需的酶量定義為1個(gè)酶活力單位，即1U。
3. 使用方法
3.1. 在EP管中配制如下反應(yīng)體系（建議）
組分 | 體積 |
融合蛋白 | 20 μg |
10X SUMO Protease Buffer | 20 μL |
ddH2O | to 190 μL |
SUMO Protease | 10 μL
|
Total volume | 200 μL |
3.2. 30℃孵育，在0.5、1、2、3小時(shí)分別吸出30 μL上述反應(yīng)液，置于單獨(dú)的EP管中。
3.3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。
3.4. 樣品全部反應(yīng)完畢后，樣品煮沸5 min，取40 μL進(jìn)行SDS-PAGE分析。確定最佳反應(yīng)時(shí)間。
【注】如融合蛋白要求低溫處理，可將反應(yīng)液置于4℃，延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，并增加SUMO酶用量，以保證酶切效果。
表1. 不同溫度下SUMO蛋白酶切活性
反應(yīng)時(shí)間（h） | 不同溫度下剪切活性（%） | |||
4℃ | 16℃ | 25℃ | 30℃ | |
0.5 | 48 | 73 | 83 | 88 |
1 | 60 | 87 | 90 | 93 |
2 | 71 | 94 | 94 | 95 |
3 | 74 | 95 | 95 | 95 |
4. 儲(chǔ)存和運(yùn)輸穩(wěn)定性
儲(chǔ)存穩(wěn)定性：長(zhǎng)期儲(chǔ)存于-80℃，或解凍后保存于-20℃使用。
5. 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
無動(dòng)物源性：重組生產(chǎn)，無外源性的病毒污染，生產(chǎn)過程不使用任何動(dòng)物源原料。
質(zhì)量穩(wěn)定：批量生產(chǎn)，可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn)；產(chǎn)品批次間無差異，質(zhì)量穩(wěn)定。
純度高：比活高；宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
符合法規(guī)要求：生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求，生產(chǎn)過程完全遵循NSF ISO 9001:2015質(zhì)量體系并符合GMP指導(dǎo)原則。
質(zhì)量文件完整：按客戶需求，可提供相關(guān)法規(guī)支持文件。
6. 相關(guān)產(chǎn)品
重組羧肽酶B；
重組人胰蛋白酶；
重組腸激酶。
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